Fast DNA Library Plus Prep Kit?for MGI
使用說明書
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【產品名稱】
Fast DNA Library Plus Prep Kit?for MGI
【貨號/規格】
KM004-A（24?rxns）；KM004-B（96?rxns）；試用裝（6?rxns）
【產品簡述】
本試劑盒針對 MGI?高通量(liang)測序平(ping)臺，提供了一(yi)管式(shi)便捷、通用(yong)的 DNA 文庫(ku)(ku)構建(jian)方案，將片段(duan)化(hua)(hua)、末端補平(ping)和末端加 A 結(jie)合到一(yi)個步驟，大大縮短(duan)了建(jian)庫(ku)(ku)的時(shi)間、減少了繁瑣步驟造成的誤差(cha)，片段(duan)化(hua)(hua)和末端修復后的產物可(ke)直接進行接頭(tou)連接，不需額(e)外純(chun)化(hua)(hua)，后續(xu)操(cao)作(zuo)和#KM001 Fast DNA Library Prep Kit?for MGI操(cao)作(zuo)相同。完整的文庫(ku)(ku)定(ding)量(liang)可(ke)將文庫(ku)(ku)稀(xi)釋(shi)至合適(shi)濃度，用(yong)雙鏈 DNA 熒光染料方法(fa)(fa)（如Thermo Qubit Flex Fluorometer）或 qPCR 絕(jue)對定(ding)量(liang)方法(fa)(fa)。
【樣本類型】
表 1 常(chang)用DNA推(tui)薦(jian)投入量
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應用 |
樣本類型 |
推薦投入量 |
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全基因組測序 |
高質量復雜基因組 |
50ng-1μg |
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全外顯(xian)子靶向捕(bu)獲測序 |
高質量復雜基因組 |
10ng-1μg |
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全基因組靶向捕獲測序 |
FFPE DNA |
≥50ng |
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全基因組測序 |
微生物基因組 |
1ng-1μg |
推(tui)薦使(shi)用 TE 或超(chao)純水溶解 DNA 樣品，如樣品中含有 EDTA，則需磁珠(zhu)純化或加入一定體積(ji)的 Neutralization Buffer 中和。
【儲存(cun)條件及(ji)有效期】
所有(you)試劑(ji)均(jun)應保存于(yu)-20℃，Ligation Buffer 在低溫(wen)下(xia)會有(you)晶體析出，屬正常現象， 應平衡至室溫(wen)后使(shi)用，產品有(you)效期為(wei) 12 個月。
【組成成分】
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組分 |
24 rxns |
96 rxns |
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FEP Buffer |
120?μl |
480?μl |
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FEP Enzyme Mix |
240?μl |
2×480?μl |
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Fast DNA Ligase |
120?μl |
2×240?μl |
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Fast Ligation Buffer |
600?μl |
4×600?μl |
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2× HIFI Library PCR Master Mix |
600?μl |
4×600?μl |
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Primer Mix?for MGI * |
120?μl |
480?μl |
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Neutralization Buffer |
120?μl |
480?μl |
*FEP Buffer 為片段(duan)化、末端(duan)修(xiu)復的反(fan)應 buffer，FEP Enzyme Mix 為片段(duan)化、末端(duan)修(xiu)復相(xiang)關酶(mei)混合物。
*若有(you)多(duo)個樣本，則推薦使用#KM002 和(he)#KM003 接頭(tou)引(yin)(yin)物(wu)(wu)組合，本試劑盒提供一套(tao)引(yin)(yin)物(wu)(wu)，引(yin)(yin)物(wu)(wu)序列如下：
5’-TGTGAGCCAAGGAGTTG-3’
5’-GAACGACATGGCTACGA-3’
備注：分選磁珠(zhu)推薦使用#NC1011 GDSPure?DNA Selection Magbeads 或 AMPure XP beads。