T4 DNA Ligase
貨號/規格：E1014-A/200 Weiss U; E1014-B/1,000 Weiss U; E1014-C/5,000 Weiss U
濃度：5 Weiss U/μL
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產品簡介
T4 DNA Ligase催化雙(shuang)鏈 DNA 或 RNA 中(zhong)并列的 5'-磷酸(suan)和 3'-羥基末端之間(jian)形成磷酸(suan)二(er)酯鍵。該酶可修(xiu)復雙(shuang)鏈 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜交(jiao)體(ti)中(zhong)的單鏈缺口，將 DNA 片段與(yu)粘性末端或平(ping)末端連接結合，但對單鏈核酸(suan)無活性。
T4 DNA 連接酶(mei)需要 ATP 作為輔(fu)因(yin)子。
產品組成
| 組分 | E1014-A | E1014-B | E1014-C |
| T4 DNA Ligase?(5 Weiss U/μL) | 40 μL | 200 μL | 200 μL ×?5 |
| 10X T4 DNA Ligase?Buffer | 0.5 mL | 1.5 mL | 1.5 mL ×?5 |
| 50% PEG | 0.3 mL | 1.5 mL | 1.5 mL ×?5 |
儲存條件
保存于-20°C。
來源
重組 E. coli?菌(jun)株，含有從噬(shi)菌(jun)體 T4 克(ke)隆的基(ji)因(yin) 30。
單位定義
1個?Weiss 單位是指在 37°C 下 20 分鐘內催化 1 nmol 的 [32PPi] 轉化為可吸附形式所需的酶(mei)量。在以下(xia)混合(he)物中測(ce)定(ding)酶(mei)活(huo)性(xing)：
66 mM Tris-HCl （pH 7.6）、6.6 mM MgCl 2、0.066 mM ATP、10 mM DTT、3.3 μM [32PPi]。1個(ge)?Weiss 單(dan)位(wei)相當(dang)于(yu)大約 200 個(ge)粘性末(mo)端連接單(dan)位(wei)（CEU）。1個(ge)CEU是指在(zai)特定(ding)條件下（即在(zai)16°C下30分鐘(zhong)內），將λ（lambda）DNA的(de)HindIII片段連接達到50%所需的(de)酶量。
適用范圍
? 克隆限制性內(nei)切酶生成的(de) DNA 片段
??克隆 PCR 產物
? 將雙鏈寡(gua)核苷酸(suan)連接子或接頭與 DNA 相(xiang)連
? 定點突變
? 擴增片段長度多態性 (AFLP)
? 連接酶介導的 RNA 檢測
? 雙(shuang)螺旋 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜交體(ti)中(zhong)的缺口(kou)修復
? 線性 DNA 的自(zi)環化