T4 DNA Ligase, HC
貨號/規格：E1014-D/5,000 Weiss U
濃度：30 Weiss U/μL
?
產品簡介
T4 DNA Ligase催化雙(shuang)鏈 DNA 或(huo)(huo) RNA 中并列的 5'-磷酸和 3'-羥基(ji)末端(duan)(duan)(duan)之間形成(cheng)磷酸二(er)酯(zhi)鍵。該酶可修復雙(shuang)鏈 DNA、RNA 或(huo)(huo) DNA/RNA 雜(za)交體中的單鏈缺口，將(jiang) DNA 片段與粘性末端(duan)(duan)(duan)或(huo)(huo)平末端(duan)(duan)(duan)連接結合，但對單鏈核酸無活性。
T4 DNA 連接酶需要(yao) ATP 作為輔因(yin)子。
產品組成
| 組分 | E1014-D |
| T4 DNA Ligase, HC (30 Weiss U/μL) | 167 μL |
| 10X T4 DNA Ligase?Buffer | 1.5 mL ×?5 |
| 50% PEG | 1.5 mL ×?5 |
儲存條件
保存于-20°C。
來源
重組 E. coli?菌株，含(han)有從噬(shi)菌體 T4 克隆的基因(yin) 30。
單位定義
1個?Weiss 單位是指在 37°C 下 20 分鐘內催化 1 nmol 的 [32PPi] 轉(zhuan)化(hua)為可吸附形式所(suo)需的酶(mei)量。在以下混合(he)物中(zhong)測定酶(mei)活性：
66 mM Tris-HCl （pH 7.6）、6.6 mM MgCl 2、0.066 mM ATP、10 mM DTT、3.3 μM [32PPi]。1個?Weiss 單位相當于大(da)約(yue) 200 個粘性(xing)末端(duan)連(lian)接單位（CEU）。1個CEU是指在特定條(tiao)件(jian)下（即在16°C下30分鐘(zhong)內），將λ（lambda）DNA的HindIII片段連(lian)接達到(dao)50%所需的酶量。
適用范圍
? 克隆限制性內切(qie)酶生成的(de) DNA 片(pian)段
??克(ke)隆 PCR 產(chan)物
? 將雙鏈(lian)寡(gua)核苷酸(suan)連接(jie)子或接(jie)頭與 DNA 相連
? 定點突變
? 擴(kuo)增片段長度多態性 (AFLP)
? 連接(jie)酶介(jie)導(dao)的 RNA 檢測
? 雙螺旋 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜交(jiao)體中的缺口修復
? 線性 DNA 的(de)自(zi)環化