T4 DNA Ligase, HC
貨號/規格：E1014-D/5,000 Weiss U
濃度：30 Weiss U/μL
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產品簡介
T4 DNA Ligase催化雙鏈(lian)(lian) DNA 或 RNA 中并列的(de) 5'-磷酸(suan)和 3'-羥基末(mo)端(duan)(duan)之間形成磷酸(suan)二酯鍵。該酶可(ke)修復雙鏈(lian)(lian) DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜交(jiao)體中的(de)單鏈(lian)(lian)缺口，將 DNA 片段與粘性(xing)末(mo)端(duan)(duan)或平末(mo)端(duan)(duan)連接結(jie)合，但對單鏈(lian)(lian)核酸(suan)無活性(xing)。
T4 DNA 連接酶需要 ATP 作(zuo)為輔因子。
產品組成
| 組分 | E1014-D |
| T4 DNA Ligase, HC (30 Weiss U/μL) | 167 μL |
| 10X T4 DNA Ligase?Buffer | 1.5 mL ×?5 |
| 50% PEG | 1.5 mL ×?5 |
儲存條件
保存于-20°C。
來源
重組 E. coli?菌株(zhu)，含(han)有從(cong)噬菌體 T4 克隆(long)的基因 30。
單位定義
1個?Weiss 單位是指在 37°C 下 20 分鐘內催化 1 nmol 的 [32PPi] 轉(zhuan)化為可吸附形式所需的(de)酶量。在以(yi)下混合物中測定酶活性：
66 mM Tris-HCl （pH 7.6）、6.6 mM MgCl 2、0.066 mM ATP、10 mM DTT、3.3 μM [32PPi]。1個(ge)?Weiss 單(dan)位(wei)相當(dang)于大約 200 個(ge)粘性末端(duan)連(lian)接單(dan)位(wei)（CEU）。1個(ge)CEU是指在特定條件下（即在16°C下30分鐘內），將λ（lambda）DNA的HindIII片段連(lian)接達到50%所需的酶量。
適用范圍
? 克隆(long)限制性內切酶生(sheng)成的 DNA 片(pian)段(duan)
??克隆 PCR 產物
? 將雙(shuang)鏈寡核苷酸連(lian)接子或接頭與 DNA 相(xiang)連(lian)
? 定點突變
? 擴增(zeng)片(pian)段長度多(duo)態性(xing) (AFLP)
? 連接(jie)酶介(jie)導(dao)的 RNA 檢測
? 雙螺旋(xuan) DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜交體中的缺口修復
? 線性 DNA 的自環化