DNase I, RNase-Free, HC
貨號/規格：E1018-A/1,000 U
濃度：50 U/μL
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產品簡介
DNase I（無 RNase）是一種可酶切單鏈和雙鏈 DNA 的(de)核(he)酸(suan)(suan)內切酶。它水(shui)解磷酸(suan)(suan)二酯鍵，產生(sheng)帶有(you) 5'-磷酸(suan)(suan)基(ji)(ji)團(tuan)和 3'-OH 基(ji)(ji)團(tuan)的(de)單脫氧核(he)糖核(he)苷(gan)(gan)酸(suan)(suan)和寡脫氧核(he)糖核(he)苷(gan)(gan)酸(suan)(suan)。
該酶的活性嚴格依賴于 Ca2+，由 Mg2+?或 Mn2+?離子活化。
在 Mg2+?存在時，DNase I 以統計意義上隨機的方式獨立切割 dsDNA 各鏈。Mn2+?存在(zai)時，該酶幾乎在(zai)同一(yi)位點切割(ge)兩條 DNA 鏈，產生(sheng)帶(dai)有平末端或(huo)(huo)僅一(yi)或(huo)(huo)兩個核(he)甘酸的(de)突出端的(de) DNA 片段。
產品組成
| 組分 | E1018-A |
| DNase I, RNase-Free, HC?(50 U/μL) | 20 μL |
| 10X DNase I?Buffer (Mg2+?Plus) | 1 mL |
| EDTA (50 mM) | 1 mL |
儲存條件
保存于-20°C。
來源
重組 E. coli?菌株，含(han)有編(bian)碼(ma)牛 DNase I 的克隆基因。
單位定義
一個(ge)單位是(shi)指在37°C下(xia)1分鐘內完全(quan)降解(jie) 1 μg質(zhi)粒(li) DNA所(suo)需的酶(mei)量(liang)。
在以下混合物中測定酶(mei)活性：
10 mM Tris-HCl（25°C 時 pH 7.5）、2.5 mM MgCl?2、0.1 mM CaCl?2、1 μg pUC19 DNA。一個 DNase I 單位相當于 0.3 Kunitz 單位。
特點
? 重組酶
? 從非動物宿(su)主純化(hua)而來(lai)，內源性 RNase 水(shui)平(ping)較低
適用范圍
? 制備不含 DNA 的(de) RNA
? 體外(wai)轉錄后(hou)去除模板 DNA
? 在進(jin)行 RT-PCR 和 RT-qPCR 之(zhi)前制備無 DNA 的 RNA
? 與 DNA 聚合(he)酶 I 配合(he)，通過缺口平移進行 DNA 標記
??采用(yong) DNase I（無 RNase）足跡法進行 DNA-蛋白相互作用(yong)研究
? 生成隨機重疊 DNA 插入片段文庫。使用含有 Mn2+?的反應緩沖液