Proteinase K (recombinant), PCR grade
貨號/規格：E1019-A/1 mL; E1019-B/1 mL?×?5
濃度：≥?600 U/mL (~20 mg/mL)
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產品簡介
蛋白(bai)酶K是一(yi)種能夠打開(kai)脂肪族、芳香族或(huo)疏(shu)水氨基(ji)酸羧(suo)基(ji)端肽鍵的內分解酶。蛋白(bai)酶K屬于絲氨酸蛋白(bai)酶家族。本品最小(xiao)可水解四肽。
產品組成
| 組分 | E1019-A | E1019-B |
| Proteinase K (recombinant), PCR grade | 1 mL | 1 mL×5 |
儲存條件
保存于-20°C。
來源
重組畢赤酵母菌株，含有來自Tritirachium?album的克隆基因。
單位定義
一個單位是指使用變性血紅蛋白作為底物，在37°C下1分鐘內釋放出對應于1μmol酪氨酸的Folin陽性氨基酸和肽所需的酶量。在以下混合物中測定酶活性：0.08M磷酸鉀（pH 7.5），5M尿素，4mM NaCl，3mM CaCl?2和16.7mg / mL血紅蛋白(bai)。
特點
? 即用型溶液
? 兼容廣(guang)泛(fan)的反應條件
適用范圍
? 從鼠尾(wei)中分離基因組(zu)DNA
? 從培養細胞中(zhong)分離基因組DNA
? 在從(cong)組織(zhi)或細胞系分離(li)DNA和RNA的過程(cheng)中清除DNase和RNase
? 確定酶的位置
? 改善PCR產(chan)物的克隆效率
抑制與失活
? 苯基(ji)甲(jia)基(ji)磺(huang)酰(xian)氟和(he)氟化(hua)二異丙基(ji)磷酸(suan)酯完全抑制該酶(mei)。
? 蛋(dan)白(bai)酶(mei)(mei) K 不(bu)會被金屬螯(ao)合劑(ji)、硫醇反應性(xing)試(shi)劑(ji)或特定的胰(yi)蛋(dan)白(bai)酶(mei)(mei)和糜蛋(dan)白(bai)酶(mei)(mei)抑(yi)制劑(ji)滅活。
注意事項
? 蛋白酶(mei)K的推薦(jian)工作濃度為(wei)0.05至1mg/mL。0.2至1%的SDS或(huo)1至4M的尿素能夠提升酶(mei)活
? Ca2+能夠(gou)保護(hu)蛋白酶(mei)(mei)K抵(di)抗自分解作(zuo)用(yong)，增(zeng)加熱穩定(ding)性并(bing)能夠(gou)調節蛋白酶(mei)(mei)K底物結合位點的(de)功能
? 在很寬的(de)pH值范(fan)圍(wei)(wei)內(nei)保(bao)持穩定：pH4.0至(zhi)12.5，最佳(jia)活性范(fan)圍(wei)(wei)為pH 7.5至(zhi)8.0
? 在50至(zhi)55°C具有最優的活性
? 在65°C以上(shang)溫度迅速發(fa)生變性(xing)
本品僅供(gong)科學(xue)研究使用。