近期,佛山地區報告了較多的基孔肯雅熱病例,引發了公眾的廣泛關注。基孔肯雅熱(Chikungunya fever,CHIK)是一(yi)種由基(ji)孔肯雅病(bing)毒(Chikungunya virus,?CHIKV)引(yin)起的蚊媒傳(chuan)播(bo)疾病(bing),通常(chang)由埃及伊(yi)蚊和(he)白紋伊(yi)蚊傳(chuan)播(bo)。患(huan)(huan)者(zhe)通常(chang)會出(chu)現高燒(shao)、劇烈關節(jie)痛(tong)、皮(pi)疹等癥狀(zhuang),尤其(qi)是關節(jie)痛(tong)可能持續(xu)幾個月,給(gei)患(huan)(huan)者(zhe)帶來極大的困(kun)擾(rao)。雖然此病(bing)本身并不致(zhi)命,但在(zai)沒有(you)有(you)效治療的情況下,嚴重的癥狀(zhuang)會影響患(huan)(huan)者(zhe)的生(sheng)活質量。

CHIKV屬于披膜病(bing)毒(du)(du)科甲病(bing)毒(du)(du)屬,病(bing)毒(du)(du)顆粒呈球(qiu)形(xing),有包膜,直徑60-70nm,只有1個血清(qing)型(xing)。病(bing)毒(du)(du)基因組(zu)為單(dan)股正鏈RNA,全長約11.8kb,內含單(dan)一可讀框(kuang)依次(ci)編(bian)碼(ma)4種非結(jie)構(gou)蛋(dan)(dan)白和(he)5種結(jie)構(gou)蛋(dan)(dan)白。根(gen)據病(bing)毒(du)(du)基因組(zu)遺傳(chuan)進(jin)化分(fen)析,可分(fen)為3個基因型(xing),分(fen)別(bie)為西非型(xing)、東中(zhong)南(nan)非型(xing)和(he)亞洲型(xing),其中(zhong)東中(zhong)南(nan)非型(xing)病(bing)毒(du)(du)突變形(xing)成的(de)印度洋分(fen)枝(IOL)的(de)病(bing)毒(du)(du)株,更易(yi)于經白紋伊蚊叮(ding)咬傳(chuan)播。
佛山的(de)(de)基(ji)孔(kong)肯雅熱(re)病(bing)例(li)增多,提醒了我們蚊(wen)(wen)媒傳(chuan)播(bo)(bo)疾病(bing)的(de)(de)嚴(yan)峻形勢。隨著(zhu)城(cheng)市化進程加快和(he)(he)(he)氣候(hou)變化的(de)(de)影響,蚊(wen)(wen)蟲的(de)(de)繁殖速度和(he)(he)(he)分布(bu)范(fan)圍不斷擴大,導(dao)致蚊(wen)(wen)媒傳(chuan)播(bo)(bo)疾病(bing)的(de)(de)爆(bao)發(fa)風(feng)險上升。在這一(yi)背景下,分子生物學檢測技術,尤其是(shi)PCR和(he)(he)(he)RT-PCR,成為(wei)了疾病(bing)監測和(he)(he)(he)診斷的(de)(de)重要手段。
?常見蚊媒傳播疾病?
瘧疾
瘧疾是(shi)(shi)由瘧原蟲(chong)引起的(de)寄生蟲(chong)病(bing),主要(yao)通過按蚊傳播。盡管瘧疾在(zai)全球(qiu)范圍內得(de)到了控(kong)制,但它依然(ran)是(shi)(shi)熱(re)帶地區重要(yao)的(de)公共衛生問(wen)題。瘧疾癥狀包(bao)括發熱(re)、寒戰、頭痛、貧血(xue)等,嚴重時(shi)可導致死亡。通過PCR技術檢測瘧原蟲(chong)的(de)DNA,可以在(zai)早期準確(que)診(zhen)斷和(he)分型(xing),有助于及時(shi)治療和(he)控(kong)制疫情(qing)。
登革熱
登(deng)革熱由登(deng)革病毒(du)引起,主要通過埃及伊蚊和白紋伊蚊傳播(bo)。感(gan)染者(zhe)通常會出現高(gao)燒、關節(jie)痛、皮疹等(deng)癥(zheng)狀。近(jin)年來,登(deng)革熱的(de)發病率逐(zhu)年上升(sheng),特別是在東南亞、南美(mei)等(deng)地(di)區。通過RT-PCR技術,可(ke)以快速(su)檢測出病毒(du)RNA,尤其在急性期能夠高(gao)效檢測,幫助(zhu)醫生快速(su)確(que)診(zhen)并采取治療措施。
寨卡病毒病
寨(zhai)(zhai)卡(ka)病毒(du)病是由(you)寨(zhai)(zhai)卡(ka)病毒(du)引起的(de),主要通過埃及伊蚊(wen)傳(chuan)播(bo)。寨(zhai)(zhai)卡(ka)病毒(du)特別對孕婦危(wei)險,可(ke)能導致胎兒腦部發育異常,甚至引發小頭癥。隨(sui)著全球旅行的(de)增加,寨(zhai)(zhai)卡(ka)病毒(du)的(de)傳(chuan)播(bo)范(fan)圍不斷擴大。RT-PCR技術是診斷寨(zhai)(zhai)卡(ka)病毒(du)的(de)關鍵工具,可(ke)以在早期發現病毒(du)感染,從而(er)防止母嬰傳(chuan)播(bo)。
黃熱病
黃熱(re)病是一種由黃熱(re)病毒引起的(de)(de)急性傳染(ran)病,主(zhu)要通(tong)過(guo)蚊(wen)蟲傳播。黃熱(re)病的(de)(de)癥狀包(bao)括高燒、黃疸、出(chu)血(xue)等,嚴重時可能導(dao)致肝臟(zang)衰(shuai)竭甚至死(si)亡。黃熱(re)病主(zhu)要流(liu)行于非洲(zhou)和南美洲(zhou)。通(tong)過(guo)RT-PCR技術,可以快(kuai)速確(que)認病毒的(de)(de)存(cun)在,并且進行病毒基因組分析,以便進行流(liu)行病學研究和防控(kong)。
西尼羅河病毒病
由西尼(ni)羅河病(bing)毒(du)引起,庫蚊是其主(zhu)要傳播媒介。大多數(shu)感(gan)染者沒有癥(zheng)狀(zhuang),但少數(shu)人可能會出現(xian)腦(nao)炎(yan)、腦(nao)膜炎(yan)等(deng)(deng)嚴重并發癥(zheng)。西尼(ni)羅河病(bing)毒(du)主(zhu)要在美國、歐(ou)洲等(deng)(deng)地區流行。通過RT-PCR技術,可以檢測到病(bing)毒(du)RNA,幫助及時診斷并控制疫情蔓延。
日本腦炎
日本(ben)腦(nao)炎是由日本(ben)腦(nao)炎病毒引(yin)起(qi)的(de),主要(yao)通過庫蚊傳(chuan)播。該病通常表(biao)現(xian)為高熱、頭痛、嘔吐、昏迷等神經系統癥狀(zhuang),嚴(yan)重(zhong)者可能導致死(si)亡。日本(ben)腦(nao)炎主要(yao)流行于亞洲地區(qu)。RT-PCR技術能夠幫(bang)助(zhu)快速診斷,并評估病毒的(de)遺傳(chuan)變(bian)異(yi)情況,確(que)保早期干預。
基孔肯雅熱
基孔肯雅熱是由基孔肯雅病(bing)(bing)毒引起的,通(tong)常通(tong)過埃及伊蚊和(he)白紋伊蚊傳播。感染者(zhe)常出現高燒、劇(ju)烈關節(jie)(jie)痛、皮疹等癥狀。基孔肯雅熱的癥狀可能持續數周(zhou)甚至數月(yue),關節(jie)(jie)痛尤其(qi)讓患者(zhe)極(ji)為(wei)困(kun)擾(rao)。通(tong)過RT-PCR,可以檢測病(bing)(bing)毒的RNA,進行早期診斷(duan),并有效排(pai)除與其(qi)他相似(si)疾病(bing)(bing)(如登革熱)的混淆。
分子技術助力蚊媒疾病檢測?
隨著(zhu)分子生物(wu)學(xue)技術的(de)(de)發(fa)展,傳(chuan)統的(de)(de)臨床診斷方(fang)法已逐漸(jian)被更加精準(zhun)和高效的(de)(de)分子檢測手(shou)段(duan)所(suo)取代(dai)。特別是聚(ju)合酶(mei)鏈式反應(PCR)和逆轉錄聚(ju)合酶(mei)鏈式反應(RT-PCR),成為檢測蚊媒(mei)傳(chuan)播疾病(bing)的(de)(de)重要工具。
PCR技術
PCR技術,尤(you)其是qPCR(熒光定量PCR)能夠(gou)將病(bing)(bing)原(yuan)體(ti)的(de)(de)(de)基(ji)因組進行放(fang)大,從(cong)微量樣(yang)本中檢測出病(bing)(bing)毒、細菌或寄生(sheng)蟲的(de)(de)(de)存在(zai)。PCR適用(yong)于瘧疾等(deng)由遺傳物(wu)質為DNA的(de)(de)(de)病(bing)(bing)原(yuan)體(ti)引(yin)起的(de)(de)(de)疾病(bing)(bing)檢測,通(tong)過(guo)基(ji)因擴增,PCR能夠(gou)在(zai)感染初(chu)期就提供(gong)準確的(de)(de)(de)診斷結果,極大地(di)提高了(le)疾病(bing)(bing)防(fang)控的(de)(de)(de)效率。

RT-PCR技術
RT-PCR技術,包括RT-qPCR,專(zhuan)門用于檢測(ce)RNA病(bing)(bing)毒(du)(du)(du)等遺(yi)傳(chuan)物(wu)質(zhi)為RNA的(de)(de)病(bing)(bing)原體,如(ru)新(xin)冠病(bing)(bing)毒(du)(du)(du)、登(deng)革熱病(bing)(bing)毒(du)(du)(du)、寨卡病(bing)(bing)毒(du)(du)(du)和基孔(kong)肯雅病(bing)(bing)毒(du)(du)(du)等。通過逆轉(zhuan)錄將病(bing)(bing)毒(du)(du)(du)RNA轉(zhuan)化為cDNA(complementary DNA,互(hu)補(bu)DNA),RT-PCR能(neng)(neng)夠檢測(ce)到極(ji)低濃度的(de)(de)病(bing)(bing)毒(du)(du)(du)RNA,具有高敏感性和高特異性。這(zhe)使得病(bing)(bing)毒(du)(du)(du)的(de)(de)早(zao)期診(zhen)斷成為可能(neng)(neng),并且(qie)能(neng)(neng)夠用于病(bing)(bing)毒(du)(du)(du)亞型(xing)的(de)(de)鑒定,為控制疫(yi)情(qing)傳(chuan)播提(ti)供科學依(yi)據(ju)。

RNA病毒逆轉錄為(wei)DNA后再進行PCR檢測(ce)
基因測序
基因(yin)測序技術能(neng)(neng)夠提供全(quan)面的(de)(de)(de)(de)病(bing)原(yuan)信息(xi),不僅能(neng)(neng)夠確認病(bing)原(yuan)體的(de)(de)(de)(de)種(zhong)類,還能(neng)(neng)夠揭示其基因(yin)組(zu)的(de)(de)(de)(de)變異情(qing)況(kuang)。這對于病(bing)毒的(de)(de)(de)(de)流行病(bing)學(xue)研(yan)究(jiu)、疫苗研(yan)發以及藥(yao)物(wu)敏(min)感(gan)性檢測都有著重要的(de)(de)(de)(de)意義(yi)。

基(ji)因(yin)測序識(shi)別病原體(ti)
?分子檢測的優勢?
快速準確:分子檢測能夠在短時(shi)間(jian)內獲(huo)得診斷結果,尤其在疑似病例中,能夠提高診斷的(de)準確性。
高靈敏度:PCR和RT-PCR技(ji)術能(neng)夠(gou)檢測(ce)(ce)到(dao)極低(di)濃度的病原體(ti),即使在早期或(huo)潛伏期感染者中(zhong)也能(neng)檢測(ce)(ce)出病毒或(huo)寄生蟲(chong)。
病原分類:通過(guo)基因序列分(fen)析(xi),不僅能識(shi)別出病原,還能了解其基因變異(yi)情況,有(you)助于(yu)疫情監測和防(fang)控(kong)。
基孔(kong)肯(ken)雅熱病(bing)(bing)例的(de)增加提醒了我(wo)們,蚊(wen)媒傳(chuan)播疾(ji)(ji)病(bing)(bing)依(yi)然是全(quan)球公共衛(wei)生的(de)重大挑戰。隨著分子生物學(xue)技(ji)術的(de)不斷發展(zhan),PCR和RT-PCR等技(ji)術為疾(ji)(ji)病(bing)(bing)的(de)早期診(zhen)斷、病(bing)(bing)毒(du)監測和防控(kong)策略(lve)的(de)制定提供了有力的(de)支持。我(wo)們必須(xu)加強對這些(xie)疾(ji)(ji)病(bing)(bing)的(de)監測,并采取切實可行的(de)防控(kong)措施,減少(shao)蚊(wen)媒傳(chuan)播疾(ji)(ji)病(bing)(bing)對人們健康的(de)威脅。
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